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美國(guó)程序降溫盒如何使用呢?技巧有哪些
點(diǎn)擊次數(shù):2955 更新時(shí)間:2022-08-24
  美國(guó)程序降溫盒這個(gè)梯度降溫可大大提高細(xì)胞凍存的存活率,由于美國(guó)程序降溫盒內(nèi)存在100%濃度的異丙醇和泡沫內(nèi)襯,因此美國(guó)程序降溫盒也可以用于細(xì)胞復(fù)蘇。
  美國(guó)程序降溫盒的使用經(jīng)驗(yàn):雖然梯度降溫的起始點(diǎn)是室溫20°左右,但是凍存液里面的DMSO對(duì)細(xì)胞有毒性,尤其是室溫的時(shí)候,所以凍存盒和凍存液先預(yù)放至4°,等把細(xì)胞用凍存液重懸好了放入凍存盒后,立刻轉(zhuǎn)移到-80度冰箱,第二天再轉(zhuǎn)移到液氮。凍存盒中的異丙醇應(yīng)使用5~7此后更換一次,而且保證液體量不低于250ml刻度線,否則降溫效果會(huì)受到影響。異丙醇:無(wú)色透明具有乙醇?xì)馕兜目扇夹?、有毒液體,熔點(diǎn)是-87.9度。請(qǐng)注意其可燃性。
  美國(guó)程序降溫盒經(jīng)驗(yàn)1:凍存盒外表面有刻度的吧,異丙醇液面要高于zui底線。
  美國(guó)程序降溫盒肯定是先放在室溫,然后放進(jìn)去細(xì)胞,置于-80,利用異丙醇實(shí)現(xiàn)梯度降溫啊。
  美國(guó)程序降溫盒經(jīng)驗(yàn)2:實(shí)驗(yàn)室凍存盒平時(shí)放4度,需要凍細(xì)胞時(shí)直接拿出來(lái)用就可以了。第二天轉(zhuǎn)移至液氮,貴重的細(xì)胞盡快轉(zhuǎn)移,不然會(huì)影響復(fù)蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇?,F(xiàn)在也有一些商品化凍存液可以直接丟進(jìn)-80的,很方便,效果也不錯(cuò)的。
  美國(guó)程序降溫盒經(jīng)驗(yàn)3:異丙醇的量是要保證的,不能低于表明的線,否則不能起到很好的程序性降溫作用,我們是在4度放置,放了細(xì)胞后立馬放到-80度冰箱,第二天再轉(zhuǎn)移到液氮,效果很不錯(cuò)。

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